生物样本大都对温度极其敏感,尤其是细胞样本、制品。随着细胞治疗的快速发展,细胞冷冻技术及效果变得更加重要。现在也有一些冷冻降温是通过高溶度的冻存保护剂保障活率,大剂量的冻存保护剂往往对细胞、回输受体有害,如何安全有效的提高细胞及制剂的冷冻效果,是一个重要课题。
程序降温仪是一种高性能,安全可靠的温变速率可调的冷冻系统,现已广泛应用于轻工、农、医、基础生物研究等各个领域中,用于组织库、骨髓细胞、肿瘤细胞,动、植物细胞、心肌细胞等的冻存。
程序降温仪基于控制系统原理,通过传感器检测环境温度,并将其与设定的目标温度进行比较。根据差异,控制系统将启动相应的冷却或加热装置来调整环境温度,以使其逐渐接近或保持在目标温度范围内。
使用步骤:
1、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
2、配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜(DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。
3、离心收集培养之细胞,用加血清的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
4、取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ml,混合均匀,分装于已标示*之冷冻保存管中,1~2ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
应用领域:
1、转基因胚胎研究;
2、干细胞研究;
3、临床和研究样本,例如常规冷冻管中的淋巴细胞和组织细胞;
4、各种哺乳动物细胞,包括心肌细胞,脂肪,肝和肌肉;
5、脐带血干细胞;
6、微孔板中的贴壁细胞和干细胞;
7、细胞悬浮液按编号/条形码分类和储存;
8、机器人集成-CRF-1也已成功集成到机器人系统中;
9、人的和兽医的IVF(试管受精)。